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生物素標記蛋白

国产视频app生物素與親和素/鏈霉親和素的結合具有高度特異性和穩定性,兩者的親和常數比抗原-抗體反應高10-100萬倍,是目前已知強度最高的非共價作用,這使得它成為蛋白質生物化學中的一個非常好的工具。然而,高質量的生物素標記蛋白的生產目前是一個重大的挑戰。研究人員經常遇到的技術問題,包括不能充分標記,高批次間差異,和不可預知的性能表現。此外,生物素標記方法的選擇也會顯著影響最終的結果。每一個目標蛋白都有著自己獨特的生化特性,因此需要定制化的解決方案。

這些復雜的因素使得個人實驗室很難制造和使用生物素結合物,同時,很少有商業化的產品可供購買。為了填補這一空白,ACROBiosystems公司開發出了一系列獨家的預先標記且經實驗驗證的生物素標記重組蛋白。MABSOL?生物素標記蛋白包含超過上百種常用的藥物靶點和生物標志物蛋白。我們以高質量的人源細胞表達的蛋白為原料,每一步都經過充分考量,以達到最高的生物活性和檢測靈敏度。我們還使用最嚴格的質量控制,以確保最小的批次間差異

MABSOL?生物素標記蛋白系列包括兩個獨特的互補產品系列,分別是建立在Avitag?技術上的PrecisionAvi系列(查看產品列表),和使用內部開發的化學標記法的UltraLys系列(查看產品列表国产视频app)。具有嚴格的細節要求和質量檢測標準。

PrecisionAvi系列

使用Avitag?單點酶標標記技術的生物素標記蛋白

本系列產品是使用Avitag?技術專門生產的。簡而言之,一條獨特并有15個氨基酸的多肽和Avi標簽被引入在進行表達載體構建的重組蛋白上。在Avi標簽中的單一的賴氨酸殘基被大腸桿菌生物素連接酶生物素化。

  • 生物素化發生在Avi標記的賴氨酸殘基上,標記均一
  • 不影響蛋白的天然活性
  • 固定在親和素包被表面的蛋白具有方向一致性

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下列產品可提供預定服務:除常規產品外,下列尚在研發中的分子我們也接受預定。如需獲取詳細技術資料和價格請與我們聯系

UltraLys系列

使用獨特超高靈敏度的化學標記法標記的生物素標記蛋白

国产视频app UltraLys系列由優化設計的化學標記法生產。蛋白質N端的游離胺基及內部的賴氨酸側鏈上的胺基都能與生物素分子結合,通常一個蛋白質分子會被標記上多個生物素分子。

  • 較高的檢測靈敏度
  • 標記方法簡單

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產品特征

高質量的人源細胞表達蛋白

ACROBiosystems生物素標記蛋白的生產采用我們獨家的HEKMax?表達平臺進行。作為表達源,人體HEK293細胞比其他類型的細胞有著諸多優勢。

高生物活性和檢測靈敏度

生物素標記蛋白的生物活性由蛋白自身結構和生物素標記方式決定。對于每一個蛋白,我們都測試了多種標簽和生物素標記方法,用多種結合實驗進行產品評估,只選擇表現最好的蛋白進行生產。圖1為內部評估實驗舉例。

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圖 1.功能性ELISA檢測不同形式的生物素標記的PD1和rhPD-L1(Cat. No.PD1-H5258)的結合能力。

我們的生物素標記蛋白在不同的應用中均具有高生物活性和極好的檢測靈敏度。圖2功能性ELISA實驗中,生物素標記的人BCMA蛋白與BAFF有較高的結合活性。圖3是定向固定和隨機固定兩種ELISA方法的比較,結果顯示通過鏈霉親和素定向固定的生物素標記的CD155比隨機固定的非生物素標記CD155具有更高的檢測靈敏度。圖4和圖5實驗結果表明生物素標記的PD1可以很好地應用于AlphaLISA檢測其與配體PD-L1及PD-L2的結合活性。圖6和圖7 SPR實驗中可以看出,生物素標記蛋白可以很好的用于檢測蛋白與治療性抗體的親和力。此外,生物素標記蛋白也經常用于細胞實驗中,如細胞毒性實驗及CAR表達陽性率檢測實驗(如圖8和圖9所示)。

ELISA
圖 2. ELISA檢測生物素標記的Human BCMA(Cat. No. BC7-H82F0)與BAFF (Cat. No. BAF-H4268) 的結合活性,線性區間為0.12-1.95 ng/mL.。
圖3. 定向固定和隨機固定的比較實驗結果顯示,通過預先包被在96孔板上的鏈霉親和素固定的生物素標記CD155(Cat. No. CD5-H82E3)和直接包被在96孔板上的非生物素標記的CD155(Cat. No. CD5-H5223)相比,前者結合TIGIT( Cat. No. TIT-H5254)的活性更高。
AlphaLISA
圖 4. AlphaLisa檢測生物素標記的Human PD-1(Cat. No. PD1-H82F1)與PDL1 (Cat. No. PD1-H5229) 的結合活性,線性區間為0.02-0.625 μg/mL。
圖 5. AlphaLISA檢測生物素標記的Human PD-1(Cat. No. PD1-H82F1)與PDL2 (Cat. No. PD2-H5220) 的結合活性,線性區間為0.02-0.625 μg/mL。
SPR
圖 6. 在SPR實驗中,將生物素標記的human VEGF165 (Cat. No. VE5-H82Q0)通過鏈霉親和素固定在CM5芯片上,其與Avastin結合的親和常數是0.417nM(Biacore T200)。
Cell based assay
圖 7. 重組human TNF-alpha介導的對WEH1-13VAR細胞的細胞毒性實驗,EC50為0.014-0.029 ng/ml。結果顯示生物素標記的human TNF-alpha與非生物素標記的TNF-alpha表現一致。
圖 8. 生物素標記的CD19蛋白用于檢測FCM63-scFv 在293 細胞表面的表達。A:生物素標記的其它蛋白對照;B:生物素標記的human CD19 (Cat. No. CD9-H8259, 10ug/ml);C:生物素標記的human CD19 (Cat. No. CD9-H8259, 10ug/ml) 和FMC63 (Mouse anti-CD19 antibody)。

高批間一致

我們通過嚴格的質量控制確保產品的批間一致性。每一個產品不同批次會通過多種實驗方法以我們內部標準進行并行對比,只有差異在可接受范圍內的產品才會被放行。就像圖9. ELISA分析對比三個不同批次生物素標記的Human TNF-alpha(Cat. No. TNA-H82E3)和Adalimumab的結合,結果顯示這些樣品批次間差異可忽略。在細胞水平的實驗中,產品同樣具有很好的批間一致性(如圖10所示)。

圖 9. 在上述ELISA 實驗中, 檢測3個不同批次的生物素標記的human TNF-alpha (Cat. No. TNA-H82E3)與Adalimumab 的結合,結果顯示被檢樣品的批間差異性很小。
圖 10. 用代謝抑制劑放線菌素D及重組生物素標記的human TNF-alpha (Cat. No. TNA-H82E3) 介導的對WEH1-13VAR細胞的細胞毒性實驗(EC50為0.029-0.052 ng/ml),兩批TNF-alpha表現一致。

部分引用文獻

Integration of a CD19 CAR into the TCR Alpha Chain Locus Streamlines Production of Allogeneic Gene-Edited CAR T Cells

Authors: MacLeod DT et al.

Journal: Mol Ther 2017

Product: biotinylated Human CD19(Cat. # CD9-H8259

Application: Flow Cytometry

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Quantification of active infliximab in human serum with liquid chromatography-tandem mass spectrometry using a tumor necrosis factor alpha -based pre-analytical sample purification and a stable isotopic labeled infliximab bio-similar as internal standard: A target-based, sensitive and cost-effective method

Authors: El Amrani M et al.

Journal: J Chromatogr A 2016

Product: biotinylated human recombinant TNF-alpha(Cat. # TNA-H8211

Application: ELISA

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ANTIBODY-DRUG CONJUGATE HAVING IMPROVED STABILITY AND USE THEREOF

Authors: Kim Young Min et al.

Journal: United States Patent Application 20160136300 2016

Product: ErbB2(Cat. # HE2-H822R

Application: 国产视频appELISA

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A simplified procedure for antibody engineering by yeast surface display: coupling display levels and target binding by ribosomal skipping

Authors: Grzeschik J et al.

Journal: Biotechnol J 2016

Product: EpCAM(Cat. # EPM-H8223

Application: Flow Cytometry

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Microsphere-based immunoassay integrated with a microfluidic network to perform logic operations

Authors: 国产视频appPooja Sabhachandani et al.

Journal: Microchimica Acta 2015

Product: biotinylated human TNF-α(Cat. # TNA-H8211

Application: Microsphere-based assay

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The Shark Strikes Twice: Hypervariable Loop 2 of Shark IgNAR Antibody Variable Domains and Its Potential to Function as an Autonomous Paratope

Authors: Zielonka S et al.

Journal: Marine Biotechnology 2015

Product: CD3 epsilon(Cat. # CDE-H8223

Application: 国产视频appFACS sorting

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NOVEL CELL LINE SCREENING METHOD

Authors: YU et al.

Journal: United States Patent Application 20140155285 2014

Product: biotinylated TNFα(Cat. # TNA-H8211

Application: Flow Cytometry

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